林下山参根区土壤溶磷菌的筛选及对人参生长作用的研究

摘要

人参是我国传统名贵中药材，主要分布在东北三省。土壤有效磷含量低，影响参根部皂苷等干物质的积累，化学磷肥中重金属元素尤其是镉含量超标等问题又会造成人参重金属污染，导致人参品质的下降，因此，从人参土壤中筛选高效溶磷菌生产微生物肥料，对于减少磷肥施用量，提高人参品质，促进人参产业绿色发展有重要的意义。本研究以林下山参根区土壤中筛选的溶磷菌为研究对象，对人参生长的影响、分类地位、对环境的适应性和溶磷机理进行了初步研讨。取得以下结果:
　　1.以磷酸钙作为难溶性磷源，采用平板观察溶磷圈和液体摇瓶复筛相结合的方法，从林下山参根区土壤筛选到了2株高效溶磷细菌P1和P7，液体摇瓶试验中，P1可溶性磷为472.85μ g·mL-1，P7可溶性磷为437.33μ g·mL-1。
　　2.盆栽试验表明，P1处理的人参根鲜重、干重显著性高于P7，BM，CK处理，株高显著的高于对照，叶绿素含量显著的高于P7，BM，CK(P＜0.05);P1处理促进人参对土壤钾元素的吸收，提高磷素在参根中的积累量;接种菌剂可以不同程度的提高土壤酶活性，以P1处理的效果最显著，P1处理人参根际土壤脲酶、酸性磷酸酶、过氧化物酶活性均最高;对人参根中微量元素及皂苷含量的测定表明，P1处理显著地提高了人参根中Fe、Mn、Cu的含量，分别较对照增加了52.74％、127.03％、28.96％, Zn与对照相比增加19.96％;根中Rb1，Rg1，Re，Rf，Rc，Rb2，Rd，Rb38种单体皂苷含量均显著的高于P7，BM，CK。
　　3.盆栽试验效果最好的菌株P1，结合菌落形态、革兰氏染色、biolog分析、16SrRNA和全基因组序列分析对其进行鉴定，结果表明P1菌株是假单胞菌属(Pseudomonas sp)。
　　4.在液体培养条件下对P1菌株从碳源、氮源、pH三个方面评价其溶磷能力，结果表明，P1以葡萄糖、硝酸铵作为碳氮源时发酵液中有效磷含量最高，其次是葡萄糖和硫酸铵。随着培养时间的增加，P1菌株培养液中有效磷浓度与pH呈负相关。P1能在pH5～8的范围内生长溶解磷酸钙，并且pH5，pH8时发酵液中的有效磷浓度高于pH6、pH7时的有效磷浓度。

目录

声明

摘要

英文缩略表

第一章 引言

1．1 研究背景

1．2 磷在植物体中的作用

1．3 磷肥在根类中草药的作用

1．4 溶磷微生物

1．4．1 溶磷微生物的研究进展

1．4．2 溶磷微生物的种类和生态分布

1．4．3 溶磷微生物的作用机理

1．4．4 溶磷微生物的促生效果及应用

1．5 展望

1．6 主要研究内容及意义

第二章 高效溶磷菌的筛选及对人参生长的影响

2．1 材料与方法

2．1．1 材料

2．1．2 方法

2．1．3 盆栽试验

2．1．4 数据处理

2．2 结果与分析

2．2．1 溶磷菌的平板初筛结果

2．2．2 溶磷菌的摇瓶复筛结果

2．2．3 不同处理对人参植株生物量的影响

2．2．4 不同处理对土壤速效养分的影响

2．2．5 不同处理对土壤各形态无机磷的影响

2．2．6 不同处理对人参根、叶全量氮磷钾的影响

2．2．7 不同处理对人参土壤酶活性的影响

2．2．8 不同处理对人参根微量元素的影响

2．2．9 不同处理对人参皂苷含量的影响

2．3 讨论与结论

第三章 溶磷菌株的鉴定

3．1 材料与方法

3．1．1 供试菌株和培养基

3．1．2 分离菌株的生理生化分析

3．1．3 分离菌株的分子生物学鉴定

3．2 结果与分析

3．2．1 菌株P1的形态鉴定

3．2．2 分子生物学鉴定

3．2．3 Biolog分析

3．3 讨论与结论

第四章 高效溶磷菌溶磷特性研究及溶磷机理初探

4．1．5 不同氮源对P1菌株溶磷能力的影响

4．1．6 不同pH对P1菌株溶磷能力的影响

4．2 结果与分析

4．2．1 不同碳源对P1溶磷能力的影响

4．2．2 不同氮源对P1溶磷能力的影响

4．2．3 不同pH对P1溶磷能力的影响

4．3 讨论与结论

第五章 全文结论

参考文献

致谢

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