禽脑脊髓炎病毒分离株全基因序列的测定及VP1蛋白表达

摘要

本研究根据Calnek疫苗株序列设计了31条引物，利用反转录聚合酶链式反应，对我国AEV分离株L2Z株的全基因组核苷酸序列进行了测定，同时，采用Bac-to-Bac系统在昆虫Sf9细胞中成功表达了AEVVP1基因，现将结果报告如下： 对我国AEV分离株L2Z株的全基因组核苷酸序列测定的结果表明：该病毒株基因组全长为7059个核苷酸残基，包括494个核苷酸残基的5’非编码区、6402个核苷酸残基的开放阅读框和136个核苷酸残基的3’非编码区及poly(A)尾巴。与已发表的AEV疫苗株1143的基因组序列比较发现，它们之间核苷酸和氨基酸的同源性分别为98％和97.6％，与鸡胚适应株VR的基因组序列比较核苷酸和氨基酸的同源性分别为93.9％和96.4％。结构蛋白(VP1-VP4)中，主要宿主保护性免疫原蛋白VP1氨基酸之间差异较小，L2Z株与疫苗株和鸡胚适应株VP1基因的氨基酸同源性分别为99.3％和98.5％。 重组Bacmid-VP1转染昆虫细胞Sf9后，获得的重组病毒，经SDS-PAGE可见表达的AEVVP1融合蛋白，大小约为35kD。经蛋白纯化用Westernblot检测，初步证实表达的AEVVP1蛋白具有抗原活性。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩写对照表

独创性声明及关于论文使用授权的说明

第一章引言

第二章禽脑脊髓炎病毒分离株的序列测定

第三章昆虫杆状病毒表达禽脑脊髓炎病毒VP1蛋白

第四章结论

参考文献

致谢

作者简介