禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组的克隆与序列测定

摘要

根据国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列,经多重比较后设计20对引物,用RT-PCR方法对禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组进行了分段扩增,并将扩增产物分别插入到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109.用PCR方法鉴定带有阳性重组质粒的菌落,并对阳性重组质粒中插入的片段进行序列测定.测序结果表明:禽传染性支气管炎病毒分离株SAIB<,K>株全基因组被成功的分段克隆到pMD18-T载体中;分离株SAIB<,K>株基因组序列全长27,395bp,与国际基因库(GenBank)上公布的3株IBV全基因组序列Beaudette(NC001451)、BJ(AY319651)、LX4(AY217750)进行同源性比较分析,同源率在85﹪-90﹪之间.