小鼠精原干细胞分离、纯化和移植以及蓝狐卵母细胞电脉冲刺激的研究

摘要

本研究论文包括两部分内容，一部分是关于小鼠精原干细胞的研究，另一部分是关于蓝狐卵母细胞体外成熟和电脉冲刺激的研究。 小鼠精原干细胞的研究包括4个实验：实验一、小鼠胚胎成纤维细胞饲养层的制作，为本实验室正在开展的胚胎干细胞和精原干细胞研究提供了饲养层细胞，建立了小鼠胚胎成纤维细胞系；实验二、小鼠精原干细胞的分离纯化，通过两步酶消化法分离6～8日龄小鼠睾丸细胞，Percoll不连续密度梯度离心，获得了较多数量的活细胞，可用于进一步培养和移植；实验三、精原干细胞移植模型小鼠的制作，通过对4周龄昆明白小鼠腹腔内单次注射白消安(30mg/kg和40mg/kg体重)，30天后获得了可用作精原干细胞移植的受体模型小鼠；实验四、小鼠精原干细胞移植，成功通过睾丸网注射精原干细胞，建立了小鼠精原干细胞移植体系，为转基因动物生产开辟了新途径。 蓝狐卵母细胞体外成熟培养部分共一个实验：蓝狐卵母细胞体外成熟和电脉冲刺激的研究，采集乏情期蓝狐卵巢，切割法获得卵母细胞，体外成熟不同时间(24小时、48小时、72小时)进行电脉冲刺激，促进了卵母细胞的体外成熟；再对成熟培养到96小时的卵母细胞进行第二次电脉冲刺激，促进了卵母细胞的成熟和孤雌发育。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略语表

声明

第一部分文献综述

第二部分研究论文

实验一MEF饲养层的制备

实验二小鼠精原干细胞的分离纯化

实验三精原干细胞移植受体模型小鼠的制作

实验四小鼠精原干细胞移植

实验五电脉冲刺激对蓝狐卵母细胞体外成熟及孤雌发育的影响

总结

参考文献

附图

致谢

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