苜蓿植株再生体系的建立及sacB基因转化的影响因素研究

摘要

针对目前面临的生态环境问题,培育出能够适应干旱、半干旱和盐碱地的苜蓿草种将有利于生态环境的恢复和治理.同时抗旱、耐盐碱苜蓿转基因新品种的培育和推广也必将带来很好的社会和经济效益.借助植物基因工程手段提高苜蓿抗旱性是现代育种的重要途径.本文探讨了5个苜蓿品种(秘鲁、富平、甘农1号、甘农2号、甘农3号)的组织培养程序,确定出再生能力最强的品种及外植体.利用农杆菌介导法转化sacB(果聚糖合成酶)基因,建立了一套农杆菌介导苜蓿基因转化的优化体系.

目录

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主要英文缩略词表

前言

一文献综述

1耐盐基因工程研究进展

1.1与耐盐有关的基因

1.2耐盐转基因植物

1.3果聚糖合成酶及其相关基因的研究进展

2苜蓿转基因技术研究国内外发展现状和趋势

2.1国外苜蓿转基因技术研究进展

2.2我国苜蓿转基因技术的现有技术基础

3植物转基因方法及应用

3.1农杆菌介导的植物基因转化技术

3.2聚乙二醇(PEG)介导的基因转化法

3.3脂质体介导的基因转化法

3.4电穿孔法

3.5基因枪法

3.6花粉管通道法

3.7其他方法

二苜蓿不同品种植株高效再生体系的建立

1材料与方法

1.1试验材料

1.2评价指标

1.3试验方法

2结果与分析

2.1愈伤组织的诱导

2.2芽的分化

2.3根的诱导

2.4再生苗的移栽

3讨论

3.1外植体再生能力

3.2褐化的产生

3.3玻璃苗

4小结

三根癌农杆菌介导的果聚糖合成酶基因(sacB)转化体系的建立

1材料与方法

1.1材料

1.2实验设计

2结果与分析

2.1选择培养基中卡那霉素选择压的确定

2.2选择培养基中抗菌素种类及其浓度的确定

2.3农杆菌介导的转化体系的建立

2.4抗性植株的获得

3讨论与小结

3.1农杆菌菌株对转化的影响

3.2不同受体对转化的影响

3.3筛选体系对转化的影响

3.4小结

四结论

致谢

参考文献

附图

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