超声导入复方三七消痛软膏对兔膝骨性关节炎软骨细胞caspase-3、caspase-9及XIAP表达的影响

摘要

目的：
　　研究超声导入复方三七消痛软膏对兔膝骨性关节炎(Knee Osteoarthritis，KOA)模型软骨组织的形态学改变情况，以及软骨细胞凋亡调控基因caspase-3、caspase-9及XIAP表达的影响，明确超声导入复方三七消痛软膏对KOA的疗效和可能机制。
　　方法：
　　40只6月龄新西兰白兔随机分为5组，复方三七消痛软膏超声导入治疗组、复方三七消痛软膏外擦治疗组、普通耦合剂超声治疗组、模型组、正常组，每组各8只。除正常组外的其余4组动物均行前交叉韧带切断术(ACLT)，制作兔KOA模型，并于6周后对5组动物进行相应的干预。超声导入复方三七消痛软膏组和普通耦合剂超声波组均用超声治疗仪，超声波参数为强度300mW/cm2、脉冲通断比为20％、频率为1MHz，治疗每次10分钟，每天1次，连续6天为1疗程，停1天后，再行下1疗程，共2个疗程;软膏外擦组仅予复方三七消痛软膏外擦膝关节相应部位;模型组和正常组不予干预，正常饲养。2个疗程结束后各组动物予以处死，取出股骨髁并肉眼观察大体病变，经过4％多聚甲醛固定、脱钙、石蜡包埋、切片，脱蜡入水后行HE染色，封片后行软骨组织形态学观察，并对其行改良Mankin评分，再应用免疫组织化学染色法检测各组软骨组织中caspase-3、caspase-9及XIAP的表达情况。
　　结果：
　　1.大体肉眼观察:与正常组相比，导药组、超声波组、药膏外擦组和模型组均出现不同程度骨关节炎表现，且导药组、超声波组和软膏外擦组软骨损伤程度比模型组轻。
　　2.在组织形态学上，软骨组织退变程度由轻至重依次是正常组、超声导入复方三七消痛软膏组、复方三七消痛软膏外擦组、超声组、模型组。
　　3.IOD值比较:与正常组相比，超声导药组、中药软膏外擦组、超声波组和模型组caspase-3、caspase-9免疫组化检测所得的IOD值明显升高，XIAP的IOD值显著下降，各组间比较均具有显著统计学意义(P=0.000＜0.01，P=0.000＜0.01，P=0.000＜0.01);与模型组相比，超声导药组、超声波组和中药软膏外擦组caspase-3、caspase-9免疫组化检测所得的IOD值降低，XIAP表达升高，组间比较均具有显著差异性(P=0.000＜0.01，P=0.000＜0.01，P=0.000＜0.01）;与超声导药组相比，超声波组和中药软膏外擦组caspase-3、caspase-9表达增高，XIAP表达降低，其中超声波组（P=0.000＜0.01，P=0.000＜0.01，P=0.000＜0.01），中药软膏外擦组（P=0.000＜0.01，P=0.000＜0.01，P=0.000＜0.01），组间比较均具有统计学意义;超声波组IOD值稍低于中药软膏外擦组，组间比较无统计学意义(P=0.991＞0.05，P=0.999＞0.05，P=1.000＞0.05)。
　　结论：
　　1.复方三七消痛软膏外擦以及超声导入和单一的超声波这三种不同的治疗方法均对兔KOA有效，且超声导药的治疗效果较其他两种治疗方法更好。
　　2.复方三七消痛软膏外擦以及超声导入和单一的超声波这三种不同的治疗方法对兔KOA的治疗机制可能是通过调节兔KOA软骨细胞caspase-3、caspase-9及XIAP的表达。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 实验材料

1．1 实验动物

1．2 实验主要药物、试剂

2 实验方法

2．1 实验动物分组

2．2 兔KOA模型建立

2．3 实验干预

2．4 软骨标本采集及大体观察

2．5 软骨组织形态学观察

2．6 免疫组化检测

2．7 统计学处理

结果

1 一般情况

2 软骨组织大体肉眼观察

3 软骨组织HE染色及其改良Mankin评分比较

4 软骨细胞caspase-3、caspase-9及XIAP免疫组化结果

分析与讨论

1 现代医学对KOA的认识

1．1 KOA与软骨细胞凋亡的关系

1．2 caspase-3，caspase-9，XIAP与软骨细胞凋亡的关系

2 KOA动物模型的选择及建立

3 超声波对KOA的治疗

4 复方三七消痛软膏对KOA的治疗

4．1 中医学的认识

4．2 复方三七消痛软膏对KOA的治疗

5 超声导入复方三七消痛软膏对KOA的治疗

6 不足与展望

结论

参考文献

附录

致谢

文献综述

作者简历