急性冠脉综合征患者外周血中CD39+调节性T淋巴细胞的变化及与Il-10、Il-17浓度的相关性分析

摘要

目的:研究急性冠脉综合征(ACS)患者外周血中CD39+Treg的变化，以及CD39+调节性T淋巴细胞比例与IL-10、IL-17浓度的相关性分析。
　　方法:收集2015年1月到2016年1月在厦门大学附属第一医院心血管内科71例冠状动脉造影的住院患者，急性冠脉综合征(ACS)组(38例)、稳定型心绞痛(SA)组(16例)、冠脉正常对照(NAC)组(17例)。其中20例(ACS组12例、SA组4例、NAC组4例)采用RT-PCR检测患者外周血单核细胞(PBMC)中CD39mRNA、Foxp3mRNA的相对表达量;另外51例[ACS组26例(AMI6例，UA20例)、SA组12例、NAC组13例]采用流式细胞仪检测CD39+Treg比例，采用夹心酶联免疫法(ELISA)测定流式分析组中各例的血浆IL-17、IL-10的浓度。
　　结果:(1)①ACS组外周血PBMC的CD39mRNA的相对表达量(2-ΔΔCt)较NAC组和SA组显著减少，差异具有统计学意义(P＜0.05），NAC组和SA组组间比较，差异无统计学意义(P＞0.05）;②ACS组外周血PBMC的Foxp3mRNA的相对表达量(2-ΔΔCt)较NAC和SA组显著减少，差异无统计学意义(P＞0.05),NAC组和SA组组间比较，差异无统计学意义(P＞0.05);③CD39mRNA的相对表达量与Foxp3mRNA的相对表达量呈正相关的关系(r=0.629，P=0.003);(2)①ACS患者外周血CD4+CD25+、CD4+CD39+、CD4+CD25+CD39+占CD4+细胞比例较NAC组和SA组显著减少，差异具有统计学意义(P＜0.05），在NAC组和SA组组间比较，差异无统计学意义(P＞0.05);②外周血CD4+CD25+、CD4+CD39+、CD4+CD25+CD39+占CD4+细胞比例在急性心梗(AMI)组与不稳定型心绞痛(UA）组组间比较，差异无统计学意义(P＞0.05);③CD4+CD25+、CD4+CD39+、CD4+CD25+CD39+占CD4+细胞比例在单支病变组及非单支病变组组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);④CD4+CD25+、CD4+CD39+、CD4+CD25+CD39+占CD4+细胞比例与Gensini评分负相关(P＜0.05）;⑤CD4+CD25+、CD4+CD39+、CD4+CD25+CD39+占CD4+细胞比例与Grace评分无相关性(P＞0.05);(3)①ACS患者外周血IL-10的浓度较NAC和SA组显著减少(P＜0.05);②ACS患者外周血IL-17的浓度较NAC和SA组显著增多(P＜0.05);③CD4+CD25+Treg细胞、CD4+CD39+Treg细胞的比例与IL-10浓度呈正相关(＜0.05）;④CD39+Treg细胞的比例与IL-17浓度无相关性(P＞0.05)。
　　结论:ACS患者外周血中CD39+Treg细胞表达下调，可能与体内炎症反应相关。

目录

声明

摘要

前言

材料与方法

1 入选资料

1．1 资料收集

1．2 冠脉支数病变指标

1．3 采用Gensini评分系统对冠脉病变情况进行定量评定

1．4 采用Grace危险评分对冠脉病变情况进行定量评定

2 实验材料

2．1 主要仪器

2．2 主要试剂

2．3 主要试剂配制

3 实验方法

3．1 血液标本收集、血浆和外周单个核细胞(PBMC)的分离

3．2 Real-TimePCR检测CD39、Foxp3的mRNA的相对表达情况

3．3 三色免疫荧光标记PBMC细胞

3．4 ELISA浓度测定

3．5 SPSS统计方法分析

研究结果

1 外周血单核细胞(PBMC)各组中CD39mRNA、Foxp3mRNA相对表达量(2-ΔΔCt)比较

1．1 外周血PBMC中CD39mRNA相对表达量(2-ΔΔCt)水平与冠心病危险因素相关性分析

1．2 各组中CD39 mRNA的相对表达量(2-ΔΔCt‘)的比较

1．3 各组Foxp3mRNA的相对表达量(2-ΔΔCt)的比较

1．4 CD39mRNA的相对表达量(2-ΔΔCt)与Foxp3mRNA的相对表达量(2-ΔΔCt)的相关性分析

2 各组中外周血CD39+Treg的比较

2．1 各组研究对象一般临床资料比较

2．2 CD4+CD25+CD39+、CD4+CD25+、CD4+CD39+占CD4+细胞比例在各组的比较

2．3 外周血PBMC中CD39+调节性T细胞水平与冠心病危险因素相关性分析

2．4 不同病变支数组CD4+CD25+CD39+、CD4+CD25+、CD4+CD39+占CD4+细胞比例在各组的比较

2．5 Gensini评分与CD4+CD25+CD39+、CD4+CD25+、CD4+CD39+占CD4+细胞比例的相关性分析(r)

2．6 Grace危险评分与CD4+CD25+CD39+、CD4+CD25+、CD4+CD39+占CD4+细胞比例的相关性分析(r)

3 各组患者外周血浆IL-10、IL-17浓度

3．1 各组间IL-10、IL-17浓度的比较

3．2 CD4+CD25+CD39+、CD4+CD25+、CD4+CD39+占CD4+细胞比例与IL-10、IL-17浓度的相关性分析(r)

讨论

结论

参考文献

附录

致谢

文献综述

作者简历