采用外翻肠囊法研究甘草炮制对巴戟天中环烯醚萜类成分吸收特征的影响

摘要

目的：通过明确巴戟天采用不同比例甘草炮制后环烯醚萜类成分（如水晶兰苷和去乙酰车叶草甘酸）吸收特征的变化，为优化制巴戟天的炮制工艺提供实验依据，为深入研究制巴戟天的炮制原理奠定基础。
　　方法：巴戟天（生品和100∶3、100∶6、100∶12、100∶24的甘草炮制品）采用水提醇沉的方法提取;HPLC法测定水晶兰苷和去乙酰车叶草甘酸的含量;采用外翻肠囊法方法探究水晶兰苷和去乙酰车叶草苷酸的吸收特征;供试品采用甲醇进行沉淀蛋白;HPLC法测定样品中水晶兰苷和去乙酰车叶草苷酸的含量;利用Originpro8软件对(Q-t)进行零级吸收方程的模拟，运用SPSS21计算和分析吸收速率是否具有显著性差异。
　　结果：不同质量浓度水晶兰苷的吸收速率Ka结果：生品提取物中水晶兰苷质量浓度为100.00μg·mL-1时水晶兰苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为1.40±0.32、1.43±038、1.11±0.35、1.11±0.30;质量浓度为200.00μg·mL-1时水晶兰苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka(×10-2·μg·min-1·cm-2)分别为3.64±0.76(P＜0.01)、35.85±8.03(P＜0.01)、2.53±0.86(P＜0.05）、25.16±8.42(P＜0.01);质量浓度为400.00μg·mL-1时水晶兰苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为6.99±1.15(P＜0.01）、6.73±0.78、3.43±1.38(P＜0.01)、3.57±1.29。
　　不同质量浓度去乙酰车叶草苷酸的吸收速率Ka结果：生品提取物中去乙酰车叶草苷酸质量浓度为51.07μg·mL-1时去乙酰车叶草苷酸在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为0.69±0.13、0.68±0.20、0.49±0.16、0.50±0.19;质量浓度为102.13μg·mL-1时去乙酰车叶草苷酸在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为1.97±0.40(P＜0.01）、1.90±0.42(P＜0.01)、1.27±0.40(P＜0.01)、1.20±0.39(P＜0.05);质量浓度为204.26μg·mL-1时去乙酰车叶草苷酸在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为3.07±0.47(P＜0.01)、2.82±0.69(P＜0.01)、1.90±0.58(P＜0.01)、1.76±0.64(P＜0.01)。
　　不同比例甘草炮制后水晶兰苷的吸收速率Ka结果：生品提取物中水晶兰苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为3.64±0.76、35.85±8.03、2.53±0.86、25.16±8.42;100∶3制品中水晶兰苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为4.42±0.51、4.29±0.49(P＜0.01)、2.73±1.06、2.69±0.97(P＜0.01);100∶6制品中水晶兰苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为5.20±0.50(P＜0.01)、4.84±0.69(P＜0.01)、3.46±0.80、3.35±0.50(P＜0.01);100∶12制品中水晶兰苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为5.65±0.91(P＜0.01)、5.61±1.06(P＜0.01)、3.87±1.31(P＜0.01)、3.54±1.28(P＜0.01);100∶24制品中水晶兰苷在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka(×10-2·μg·min-1·cm-2)分别为4.97±0.76(P＜0.01)、5.39±0.95(P＜0.01)、3.48±1.01、3.05±1.14(P＜0.01)。
　　不同比例甘草炮制后去乙酰车叶草苷酸的吸收速率Ka结果：生品提取物中去乙酰车叶草苷酸在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka(×10-2·μg·min-1·cm-2)分别为1.97±0.40、1.90±0.42、1.27±0.40、1.20±0.39;100∶3制品中去乙酰车叶草苷酸在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka(×10-2·μg·mm-1·cm-2)分别为2.50±0.18(P＜0.05)、2.55±0.40(P＜0.01)、1.40±0.54、1.44±0.60;100∶6制品中去乙酰车叶草苷酸在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为2.68±0.53(P＜0.01)、2.60±0.48(P＜0.01)、1.49±0.44、1.57±0.57;100∶12制品中去乙酰车叶草苷酸在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为3.11±0.28(P＜0.01)、2.84±0.32(P＜0.01)、2.01±0.43、2.01±0.35(P＜0.01);100∶24制品中去乙酰车叶草苷酸在十二指肠、空肠、回肠、结肠的吸收速率Ka（×10-2·μg·min-1·cm-2）分别为2.76±0.33(P＜0.01）、2.24±0.51(P＜0.01)、1.83±0.44、1.78±0.41(P＜0.05)。
　　结论：水晶兰苷和去乙酰车叶草苷酸肠吸收符合零级吸收，表明水晶兰苷和去乙酰车叶草苷酸均为被动吸收，浓度越高，吸收速率越大。
　　水晶兰苷和去乙酰车叶草苷酸肠吸收速率Ka随着浓度的上升而增大。
　　随着甘草炮制比例的增大，水晶兰苷和去乙酰车叶草苷酸的吸收速率Ka先增大，后减小，在100∶12制品中达到最大值。
　　除生品外，水晶兰苷和去乙酰车叶草苷酸在各肠段的吸收速率Ka为：十二指肠≧空肠＞回肠≧结肠。

目录

声明

摘要

引言

第一节 实验方法的建立和实验条件的优化

1．试剂和仪器

1．1 试剂

1．2 仪器

2．药材及制备方法

2．1 药材

2．2 制巴戟天的炮制工艺

3．1 色谱条件

3．2 溶液的制备

3．3 样品处理

4．适应性考察

4．1 专属性

4．2 线性范围

4．3 提取回收率试验

4．4 日间精密度和日内精密度

4．5 稳定性

5．结论

第二节 外翻肠囊法实验及实验结果

1．实验动物

2．实验方法

2．1 供试品溶液的制备

2．2 外翻肠囊实验

3．数据处理及统计分析

4．1 MON和DES的吸收特征

4．2 不同质量浓度对MON与DAA的Ka比较

4．3 不同比例甘草炮制后MON和DAA的Ka比较

4．4 不同肠段对Ka的影响

第三节 讨论

第四节 结论

1 总结

2 展望

参考文献

文献综述 中药及其成分吸收实验的研究方法概况

致谢

个人简历