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循環パターンゴーストイメージングによる一分子蛍光イメージング法の開発 (第2報)-生体試料の蛍光イメージング

机译:一种通过循环模式鬼成像(第2次报告) - 生物样品的荧光成像进行一种分子荧光成像方法

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摘要

近年,分子生物学分野において単一分子の蛍光イメージングが求められている.生体分子の蛍光像を一分子単位で計測することで,単一分子の分布だけでなく医薬品との相互作用の評価が可能となり医療·創薬分野の発展に大きく寄与できる.これまで,共焦点顕微鏡による超解像技術を応用した研究が行われてきたが,照明光の集光による試料へのダメージや蛍光試料の退色が問題となる.また,一度の測定で一点の情報しか得られないため,外乱の影響を受けやすく,SN 比向上のため時間積算を行うと測定に時間を要する問題もあった.そこで,本研究では,ゴーストイメージングに着目した.ゴーストイメージングは,時間的および空間的にランダムな光強度分布をもつ照明光と,その光を物体に複数回投影して点検出器で検出した光強度との相関をとることで物体像を再構成する点検出型のイメージング法である.物体情報は,照明パターンごとに取得して積算されるため,外乱の影響を低減でき微弱光下での測定に有用である.これまでに,循環パターンによる測定時間の短縮と高感度な蛍光イメージングが可能であることを確認した.本報告では,ゴーストイメージングの空間分解能を向上させるために,照明系に縮小投影光学系を導入し,投影パターンの縮小化による微小物体のイメージングを行った.また,生体細胞の蛍光イメージングを行った結果を示す.
机译:近来,单个分子的荧光成像有在分子生物学领域的的需要。通过测量一种分子单元中的生物分子的荧光图像,可以大大促进的可能的发展和成为药物不仅单分子分布的相互作用的医疗和药物发现领域的评价。先前,通过共聚焦显微镜施加超分辨率技术的研究而做出的,褪色损伤或荧光样品的样品以通过冷凝的照明光成为问题。此外,由于仅一次获得的信息单点测量到的干扰敏感,存在需要时间来测量,并执行时间积分用于改进SN比的问题。因此,在这项研究中,我们的重点是在幻影成像。鬼通过具有时间和空间上随机的光强度分布的照明光相关对象成像的图像重,光强度检测由点检测器通过多次的光投射到所述对象的构成成像方法点检测类型。对象信息将被集成以获得每个照明图案,其可用于弱光下测量可降低干扰的影响。到目前为止,可以确认,能够通过循环模式,以缩短的测量时间的高灵敏度的荧光成像。在本文中,为了通过引入的缩小投影光学系统的照明系统,以提高鬼成像的空间分辨率,是通过还原投影的图案的微观对象的成像。还示出了荧光成像的在活细胞中的结果。

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