サブ回折限界スポットを用いた超解像手法：高倍率対物レンズ系による検証

摘要

レーザを走査して試料を照明するレーザ走査型顕微鏡は，通常の広視野顕微鏡と比べて高分解能の画像を得られることが知られている．ただし，照明光として用いる光スポットは回折限界の制約を受け，そのサイズによって空間分解能が制限される．これに対し，我々は回折限界よりも小さなサブ回折限界スポットを利用した超解像イメージングについて報告している．この手法では，蛍光励起領域が縮小され空間分解能が向上するだけでなく，多数の微小光スポットを並列に走査することで画像取得のフレームレートも向上できる．これまでに比較的低倍率の対物レンズを用いた実験によりサブ回折限界スポットを用いることの効果を示している．しかし，バイオ応用を想定すると更に高い分解能が要求されることも多い．そこで高倍率対物レンズを用いた系により本手法の有効性を検証した．