LC-MS法同时测定15N标记精氨酸发酵液中十种氨基酸

摘要

建立了液相色谱-质谱联用(LC-MS)方法测定15N标记精氨酸发酵液中可能含有的十种氨基酸(如甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸、赖氨酸、丝氨酸、苏氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、组氨酸、酪氨酸).待测精氨酸发酵液经丙酮提取,氮吹浓缩后,用液相色谱电喷雾质谱(LC-ESI-MS)进行检测.以乙腈和100 mmol/L甲酸铵为流动相(0-10min,80％B;10-1 1min,80％B-55％B;12-40min,55％B)进行梯度洗脱,经氨基柱分离,在选择离子模式(SIM)下监测特定质荷比的上述十种待测物.本方法具有发酵液前处理简单、检测结果准确,一次进样可同时测定精氨酸发酵液中多种杂酸等优点.所发展的方法可用于15N标记精氨酸发酵液中精氨酸含量和杂酸组成的分析.