扫描电镜超微结构观察鉴定蛇舌状虫属(Armillifer spp.)若虫与基于其18SrRNA基因的种系发育关系分析

摘要

目的：运用扫描电镜超微结构观察以鉴定食蟹猴体内分离的蛇舌状虫若虫，并基于18SrRNA序列分析其分子种系发育关系。方法：将保存于70%酒精中的若虫应用常规的戊二醛与锇酸双固定法，置于扫描电镜下观察。消化样品，提取全基因组DNA，对18SrRNA基因进行扩增并测序;运用序列比对软件ClustalX 1.83将测序结果与相关序列进行多重比对分析，用MEGA 4.0采用邻位相连法构建种系发育树进行分析。结论：根据此次分离到蛇舌状虫若虫的地域分布暂将其定为A.moniliformis。扫描电镜观察此次分离的若虫的体表特征，将其与之前张永年等报道的A. agkistrodontis若虫相比有明显不同，较Banaja报道的L. serrata若虫存在更为显著差异。值得一提的是该若虫腹环后缘形成的“锯齿样”饰物与L. serrata若虫腹环后缘的单行细刺是不一样的。以上的观察将为我国对A. moniliformis若虫虫种的鉴定及药物治疗等方面的研究提供基础资料。