紫花苜蓿光敏色素A基因片段的克隆及其RNA干扰载体的构建

摘要

苜蓿(Medicago sativa)的秋眠性是一种光周期效应.研究植物体内重要的光受体——光敏色素A(phytochromeA,phyA)，可能揭示其调控苜蓿秋眠性的机理.为研究其与苜蓿秋眠性的关系，本研究根据RNA干扰(RNA interference，RNAi)技术原理，以紫花苜蓿幼嫩叶片为材料，提取总RNA，选取基因cDNA序列同源性较低区域设计特异性引物，并引入相应的酶切位点，利用RT-PCR克隆phyA正、反向片段，经过3次亚克隆，构建了phyA的RNAi表达载体，制备了适合转染植物组织的农杆菌菌液，为获得缺失phyA植株创造了条件.