农杆菌介导的马唐生防菌Col-68(Colletotrichum hanaui)转化及致病突变体筛选

摘要

通过农杆菌介导转化,经过潮霉素的二次筛选,共获得约200个稳定遗传的转化子,转化效率为平均每106个分生孢子可得到150～200个转化子。对随机挑取的转化子进行PCR检测、荧光观察和Southern杂交检测结果表明T-DNA已经成功插入到炭疽病菌的基因组中。通过生物学特性分析,筛选到产孢量增强菌株2株(ZH12和ZH18),其中ZH18的产孢量达到107个/mL。此外,致病性测定结果表明,ZH2、ZH16、ZH18和ZH22这4个转化菌株的生防效果均比野生型高。经筛选得到产孢或致病性都提高的菌株,为进一步开发研究该菌成为工程菌和进行工业化生产打下基础。