高效筛选农杆菌介导基因编辑中非转基因突变体的方法

摘要

本发明公开了一种高效筛选农杆菌介导基因编辑中非转基因突变体的方法，包括以下步骤：(1)在传统基因编辑载体上连入CaMV 35S promoter启动的GUS报告基因，将载体转入农杆菌EH105中；(2)将转入载体的所述农杆菌EH105用叶盘法侵染普通烟草叶片，将侵染后的叶片接种到含有乙酰丁香酮的MS固体培养基上，在25℃下、暗环境下共培养2d；(3)将共培养的外植体接种到不含筛选压的再生培养基上，每20天更换一次新鲜同样的再生培养基；(4)将再生的白化芽接种到含有Timentin的MS培养基上，待白化苗长至3～4片叶子时，取样进行GUS染色，不含GUS信号的白化苗即为候选非转基因突变体。本发明能快速去除转基因突变体并获得非转基因突变体，方法快捷简便，更简单化、实用化。