农杆菌介导的大豆遗传转化部分体系的优化

摘要

农杆菌介导法因其快速、简便、成本低等优点是目前大豆遗传转化中最常用的方法。但是，此方法仍存在转化率较低等缺陷。本研究以含pCAMBIA1301质粒的EHA105农杆菌菌株为试验材料并结合前人研究结果，对大豆遗传转化的部分体系做进一步优化，以期提高大豆遗传转化效率，为后续转基因研究提供试验依据。实验结果表明，确定农杆菌菌液培养浓度OD600为0.4～0.6，菌液侵染浓度OD600为0.1～0.2，侵染时间1～4h，侵染时乙酰丁香酮浓度为80～120Lunol/L，共培养时的pH值为5.2～5.6。在此条件下进行大豆遗传转化，侵染后农杆菌污染率低、侵染成功率较高、获得的抗性芽较多，转化率可达8.7%。