侵染瓜类作物的三种马铃薯卷叶病毒属病毒的多重RT-PCR检测技术

摘要

病毒病害的发生严重影响了瓜类作物的产量和品质。在我国存在3种侵染瓜类的马铃薯卷叶病毒属病毒，分别是南瓜蚜传黄化病毒（CABYV）、甜瓜蚜传黄化病毒(MABYv)和丝瓜蚜传黄化病毒(SABYV)。本文就3种病毒的多重RT-PCR检测技术进行了研究，利用序列分析软件分析国外报道的和本实验室已经获得的CABYV、MABYV和SABYV序列，由于病毒难于提纯，因此用带有T7 RNA启动子的3种病毒的部分片段的质粒进行体外转录，模拟检测极限。以体外转录产物在模拟条件下确定检测灵敏度，结果表明CABYV和SABYV的检测灵敏度为1pg，MABYV的检测灵敏度为0.1pg。对于在瓜类作物体内含量极低且仅分布于韧皮部的马铃薯卷叶病毒属病毒，血清学检测存在血清质量、特异性和稳定性等诸多问题，因此，发展分子检测技术尤为重要，建立快速灵敏的检测和鉴定技术，对于侵染瓜类作物的马铃薯卷叶病毒属病毒具有极其重要的理论意义和应用价值。