新城疫病毒CLASS Ⅰ强毒株磷蛋白的表达及细胞内定位

摘要

根据Class Ⅰ新城疫病毒分离株9a Sb编码序列设计特异性引物扩增P基因，原核表达后利用纯化的蛋白免疫Balb／c小鼠制备单克隆抗体，经二次亚克隆后筛选到4株针对P蛋白的单克隆抗体，利用所得单抗进行P蛋白在细胞内定位分析，NDV 9a 5b病毒按5 m.o.i感染量接种DFl单层细胞，当PI=4h时，P蛋白呈点状弥散分布于细胞浆内;到PI=6～8h时，P蛋白聚集于细胞核周围;PI=12h时，P蛋白呈单极化聚集于细胞核一侧，而当感染后1 6h开始形成合胞体时，P蛋白在单个细胞中仍呈现单极分布;当感染至48h时，细胞核已发生碎裂，荧光强度有所减弱。这为深入开展P蛋白与病毒增殖以及在细胞周期中的发挥作用机制的研究工作奠定了基础。