GlyRS通过ELP4调控奶牛乳腺上皮细胞乳蛋白合成的机理

摘要

目的：探究甘氨酰tRNA合成酶(glycyl tRNA synthetase,GlyRS)通过转录延长因子4(elongation factor 4,ELP4)ELP4调控乳蛋白合成的作用机制.rn 方法：选用组织块培养法，体外培养并得到了纯化的奶牛乳腺上皮细胞，用蛋白质免疫印记(WB)和免疫荧光(IF)检测细胞中CK18和CSN2的表达以鉴定细胞的纯度和泌乳功能；用免疫共沉淀(Co-IP)技术沉淀并鉴定了细胞中ELP4与G1yRS的相互作用。rn 结果：ELP4过表达后CSN2表达显著上升；对G1yRS进行过表达和干扰，结果显示，GlyRS过表达后，ELP4的表达显著增加，CSN2的表达显著增加;G1yRS干扰后，ELP4的表达显著下降，CSN2的表达显著下降；GlyRS过表达后，细胞中p-NFκB1与ELP4的启动子序列结合显著增，GlyRS干扰后，细胞中p-NFκB1与ELP4的启动子序列结合显著降低。rn 结论：GlyRS应答氨基酸信号，通过调节ELP4调控乳蛋白合成的转录起始。