优化合成TetR/tetO控制的sceS系统用于天蓝色链霉菌大片段连续敲除

摘要

天蓝色链霉菌是用于链霉菌遗传发育研究的模式菌株,用于基因组操作的大片段敲除方法可分为效率较低的构建带有敲除交换臂重组质粒的传统法和效率较高但相对耗时的PCR-targeting方法。研究表明,经过密码子优化后合成的sceS构建的系统用于天蓝色链霉菌大片段敲除具有简单、快捷和无痕等优点。由于控制sceS表达的tsr启动子本底表达较高,限制了该系统用于天蓝色链霉菌的大片段连续无痕敲除。通过进一步优化合成应用于分支杆菌的TetR/tet0调控系统用于控制sceS的表达，组建的基因回路可以严紧控制sceS表达，并成功用于天蓝色链霉菌actinohordin和RED生物合成基因簇的连续无痕敲除。