大肠杆菌大质粒上的基因非完全拷贝数的敲除

摘要

本研究利用λ噬菌体Red重组酶系统对大肠杆菌F质粒上traA基因的敲除进行了研究，选择traA基因两侧的36bp作为同源臂，PCR扩增到氯霉素抗性基因的侧翼用于替代traA基因，通过氯霉素抗性筛选基因敲除候选株，用噬菌体感染来验证基因敲除与否。结果可以得到氯霉素抗性的菌株，说明基因替代成功，但大多数能被噬菌体感染，只是受感染能力降低了5倍左右，说明基因并没有所有拷贝被敲除。