HPLC-MS/MS法同时测定人体血浆中吡格列酮和格列美脲的浓度

摘要

目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定吡格列酮和格列美脲血浆浓度.方法:采用HPLC-MS/MS法,以Phenomenex Gemini C18 (50×3.0mm,5μm)为色谱柱,甲醇∶水∶甲酸＝80∶20∶0.1为流动相,流速为0.2mL/min,柱温为室温,采用选择性正离子对监测模式(MRM)进行样品测定.血浆样品酸化后,经乙酸乙酯萃取,浓集进样.结果:标准曲线的线性范围吡格列酮为6.25～2000 ng·mL-1,格列美脲为1.25～400 ng·mL-1,最低定量限分别为6.25和1.25ng·mL-1；批内批间精密度均小于10％,方法回收率分别在99.4％7～102.1％和96.4％～102.5％之间,萃取回收率分别在79.8％～86.5％和84.2％～86.2％之间,吡格列酮和格列美脲保留时间分别为1.26min和2.81min.血浆样品室温放置4h、反复冻融3次.-40℃长期保存8周、预处理后进样室放置8h、重复进样1次、萃取物放置24h,测定结果稳定,与0时刻比较变化率均符合要求.结论:该方法简便、快速,特异性高,可用于同时测定吡格列酮和格列美脲血药浓度及其人体药代动力学的研究.