耐药基因mecA阻断策略逆转MRSA耐药性研究

摘要

目的：探讨脂质体包裹的靶向耐甲氧西林金葡菌(MRSA)耐药基因mecA的硫代寡聚脱氧核苷酸(PS-ODN010)能否有效逆转MRSA对β内酰胺类抗生素的耐药性.方法：以mecA mRNA为靶点设计合成PS-ODN010；薄膜分散法制备新型的包裹PS-ODN/PEI纳米微粒脂质体；测定纳米微粒和脂质体的平均粒径；紫外法测A260nm值计算脂质体的包封率；平板克隆形成试验计数菌落数(CFU)；微量法测定细菌生长曲线；液体稀释法测定给予PS-ODN010后β内酰胺类抗生素对MRSA的最低抑菌浓度(MIC)；荧光实时定量PCR法检测PS-ODN010对mecA表达的影响.结果：PS-ODN/PEI纳米微粒和脂质体的粒径分别为(84.8±20.9)nm和(215.8±76.3)nm,脂质体的平均包封率为75.9％±3.91％.荧光实时定量PCR结果 显示脂质体包裹的PS-ODN010能明显抑制mecA的表达,并具有浓度依赖性抑制效应.给予脂质体包裹的PS-ODN010后,苯唑西林明显抑制了MRSA的生长(P＜0.01),MRSA的菌落数明显低于对照组(P＜0.01),苯唑西林等5种β内酰胺类抗生素对MRSA的MIC值均显著降低.结论：脂质体包裹的抗mecA的PS-ODN010能够选择性抑制MRSA耐药基因mecA的表达,有效的逆转MRSA对β内酰胺类抗生素的耐药性,恢复其敏感性.