携带不同NA基因的H5亚型禽流感病毒生物学特性研究

摘要

1996年,H5N1亚型高致病性禽流感首次在中国广东省水禽中被发现.此后,H5亚型高致病性禽流感在世界多个国家和地区广泛传播,给家禽行业造成巨大的经济损失,严重威胁人类健康.从2011年开始,H5N1与H9N2、H6N6、H12N8及其他亚型流感病毒重组,产生了新重组基因型的H5亚型禽流感如H5N2、H5N6、H5N8等,部分毒株表现高致病性特征,并在全球广泛流行.目前2.3.4.4分支的H5N6及H5N8在中国大部分地区都能检测到,并且有多例人感染H5N6死亡案例.然而相同H5亚型的禽流感携带不同NA片段(H5Nx)禽流感病毒的流感特点、致病性及传播特性仍然未知.为了解NA基因对H5Nx亚型AIV(Avian influenza virus)生物学特性的影响,以一株鹅源的H5N1亚型禽流感病毒A/goose/Guangdong/SH7/2013(H5N1),简称SH7株为载体,利用反向遗传操作技术,分别替换A/chicken/Hebei/LZF/2014(H5N2)、A/duck/Guangdong/673/2014(H5N6)、A/goose/Guangdong/674/2014(H5N6,NA颈部有缺失)和A/goose/Guangdong/Js1306/2014(H5N8)等毒株NA,拯救获得亲本株rH5N1(H5N1)和4株具有不同NA的H5亚型重组AIVs,分别为rH5N2(H5N2)、rH5N6(H5N6)、△rH5N6(H5N6)和rH5N8(H5N8).测定了5株重组病毒在CEF和MDCK中的增殖情况,发现CEF中各病毒滴度差异不显著,MDCK中病毒滴度由高到低依次是N8、短茎N6、N1、长茎N6和N2.动物实验表明,替换不同NA的H5亚型禽流感病毒对小鼠和SPF鸡的致病性差异显著.