全人源抗白介素21单链抗体的筛选与鉴定

摘要

白介素21是具有免疫调节功能的Ⅰ型细胞因子,在异常状态下可介导类风湿关节炎、系统性红斑狼疮和炎性肠病等多种自身免疫性疾病.为了拮抗白介素21的生物学活性,采用固相亲和筛选的方法,从Griffinl全人源噬菌体单链抗体库中筛选出抗白介素21的单链抗体.经过4轮亲和筛选,可溶性ELISA结果表明65％的噬菌体克隆可与IL-21发生特异性结合,经基因测序挑选出高亲和力的单链抗体FG8,转化至大肠杆菌HB2151中进行可溶性表达,采用镍柱亲和层析对表达的蛋白进行纯化后,SDS-PAGE和Western blot检测单链抗体相对分子质量为30k.定量ELISA分析显示,单链抗体FG8与白介素21的结合呈浓度依赖性,可进一步研究用于炎症及自身免疫性疾病的诊断及靶向性治疗。