超声波对溶菌酶结晶过程的影响

摘要

由于蛋白质对结晶条件具有高度敏感性,结晶过程操作参数的轻微改变可能会对结晶产物产生巨大影响.本文利用溶剂冻析法对溶菌酶进行了纯化.通过在溶菌酶的纯化过程中施加不同功率的超声波,研究了超声波对于溶菌酶结晶过程的影响.所得到的溶菌酶晶体属于四方晶系,并采用X-射线粉末衍射对其晶型进行了验证.采用SDS-PAGE、偏光显微镜、紫外可见光分光光度计对所得溶菌酶晶体的质量(组成和纯度、大小和形状、酶活)进行了表征.实验结果表明:超声波能够明显影响溶茸酶晶体的纯度和大小,而不会影响溶菌酶晶体的酶活.此外,讨论了超声波影响溶菌酶结晶过程的机制,从而为其他蛋白质的纯化工作提供了重要的信息及指导.