GH16家族“延长型”β-糖基转移酶的催化特性研究

摘要

糖基转移酶是一种能够合成特殊糖苷化合物的高效工具酶.具有特殊转糖苷能力的新型糖基转移酶在糖生物学研究中有着重要意义.本研究从嗜热拟青霉J18中克隆表达得到了一个“延长型”GH16家族β-糖基转移酶(PtBgt16A).该酶能够催化昆布寡糖或纤维寡糖发生转糖苷反应生成一系列更高聚合度混合寡糖.其最适反应条件为pH5.5,60°C.进一步的酶催化特性研究表明该酶催化昆布寡糖或纤维寡糖生成的混合高聚寡糖中,连接键混合有β-1,3与β-1,4糖苷键.其催化得到的寡糖混合物最高聚合度分别达到16和21.所得高聚寡糖产物聚合度连续,表明该酶在转糖苷反应过程中可能以单糖为转糖苷供体单位,使得产物聚合度逐一累积.PtBgt16A的这一特殊转糖苷机制使得其具有催化合成高聚β-葡寡糖或糖苷衍生物的应用潜力.