肝豆灵对铜负荷大鼠Notch信号通路的影响

摘要

目的：研究肝豆灵(GDL)对铜负荷大鼠海马组织Notch信号通路的干预作用,探讨肝豆灵治疗Wilson病的作用机制. 方法：将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、对照组(青霉胺0.09g·kg-1·d-1)和肝豆灵低、中、高剂量组(GDL0.48,0.96,1.92g·kg-1·d-1)共6组,每日1次灌胃;正常组及模型组给予等量生理盐水,共6周.观察海马病理改变,采用免疫组化法及实时荧光定量PCR法(RT-PCR)法检测铜负荷大鼠的海马组织Notch/Hes的表达. 结果：光镜下观察发现模型组海马区组织呈现明显凋亡特征性改变.各治疗组与模型组相比较神经元细胞变性坏死减轻,凋亡细胞减少,结构基本正常.免疫组化法检测Notch-1、Hes-1蛋白阳性信号呈棕黄色,模型组及各治疗组可见阳性表达,模型组的平均光密度值较正常组明显减少(P＜0.05),各治疗组较模型组Notch-1、Hes-1明显增加(P＜0.05),青霉胺组则有极显著差异(P＜0.01);实时荧光定量PCR检测Notch-1、Hes-1mRNA基因的相对表达:模型组海马组织的Notch-1、Hes-Ⅰ的基因相对表达量显著减少(P＜0.01),各个中西医治疗组上调了Notch-1、Hes-1mRNA基因的相对表达,其中肝豆灵高剂量组和青霉胺组与模型组比较,均显著增加表达量(P＜0.01). 结论：通腑解毒中药肝豆灵能够激活海马组织的Notch信号通路,而该信号通路的激活可能是通过调控内源性神经干细胞增殖分化,发挥促进神经功能恢复作用,刺激神经元的修复.