流式细胞术检测精索静脉曲张患者精子质膜完整性的研究

摘要

目的:应用荧光染料SYBR-14/PI双色标记法进行流式细胞术检测精索静脉曲张患者精子质膜的完整性并探讨其临床意义. 方法:随机收集120例男性精液标本,其中90例精索静脉曲张患者分为三组:VC1组(精索静脉曲张1度,n=30)、VC2组(精索静脉曲张2度,n=30)和VC3组(精索静脉曲张3度,n=30),正常生育男性为正常对照组(n=30).通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析.精液标本经PBS洗涤处理后用荧光染料SYBR14/碘化丙锭(PI)双染后上流式细胞仪分析,用发绿色荧光精子百分率(SYBR-14+/PI-％)表示质膜完整精子(PMI)的比例,检测精子质膜完整性,并预见精子的受精能力. 结果:精索静脉曲张患者与正常对照组之间SYBR-14+/PI-％、SYBR-14-/PI+％均存在统计学差异(P=0.000).精索静脉曲张患者(VC1、VC2、VC3)的精子百分率(SYBR-14+/PI-％)分别是[(54.85±3.78)％]、[(45.37±4.12)％]、[35.14±4.91)％],均显著低于正常对照组[(70.79±6.71)％],其活力顺序为:VC3＜VC2＜VC1＜对照组;120例精液标本的相关性分析表明:SYBR-14+/PI-％与精子百分率呈显著正相关(r=0.965,P=0.000),与(a+b)级精子百分率呈显著正相关(r=0.874,P=0.000),与d级精子百分率呈显著负相关(r=-0.965,P=0.000),而与PH、精液量和液化时间无显著性差异(P＞0.05). 结论:应用流式细胞术SYBR-14/PI双染法能快速、准确的检测精子质膜完整性,精索静脉曲张引起精子活力下降,可能是导致男性不育的重要原因之一.