1.碳酸酐酶抑制剂对大鼠精子发生和精子成熟的影响；2.三种人类精子质膜完整性检测方法比较

摘要

第一部分：目的:研究碳酸醉酶抑制剂对大鼠精子发生和精子成熟的影响，为研究水通道蛋白AQP1基因表达对雄性生育调控建立动物模型。方法:40mg/kg乙酞哇胺混悬液给大鼠灌胃，分别于给药Od,1d和3d处死动物，进行辜丸、附攀称重、苏木素一伊红(HE)染色和光镜下观察分析。附辜尾剪碎计数精子密度、精子活力，染色后计数精子畸形比率。测定附肇管腔液a-葡糖昔酶水平。采用罗丹明123荧光探针标记附辜精子，通过流式细胞仪检测精子线粒体膜电位。结果:乙酞哇胺组大鼠精子活力明显降低，畸形率显著增加，附睾精子线粒体膜电位明显降低，附翠管腔液a-葡糖昔酶水平有所下降，但辜丸和附辜组织学无明显病理改变。结论:碳酸配酶抑制剂可能通过影响附睾精子成熟，对雄性生殖功能有潜在影响。
　　 第二部分：目的:建立6-梭基二乙酸荧光素/碘化丙睫(6-CFDAIPI)双荧光标记方法进行精子质膜完整性的检测，并与单用伊红Y染色、低渗膨胀试验(HOS)两种检测方法进行一致性的比较。方法:随机选择30例本所人类精子库志愿者精液标本(密度_>20X106/ml、活力a+眨50％)，分别采用单用伊红Y染色、HOS和6-CFDA/PI双荧光标记试验检测精子质膜完整性，并用6-CFDA/PI双荧光标记方法检测冷冻一复苏前后的精子质膜完整性。结果:30例精液标本伊址Y染色活精子比率、HOS肿胀精子数比率、6-CFDAIPI双荧光标记结果分别为(68.8±7.6)％、(68.717.8)％和(67.917.8)％，两两比较，差异不显著((P均>0.05)，但双荧光标记能显示死活精子的过渡状态。相关性分析结果显示，三种方法检测的活精子比率均与前向运动(a+b)精子显著正相关。冷冻一复苏后精子质膜完整率显著降低。结论:6-CFDA/PI双荧光标记检测方法与单用伊红染色、HOS两种常用检测精子质膜完整性方法具有一致性，而且更具有优越性，同时能鉴定出活精子向死亡精子过渡的中间状态。

目录

研究一：碳酸酐酶抑制剂对大鼠精子发生和精子成熟的影响

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

研究二：三种人类精子质膜完整性检测方法比较

前言

研究对象和方法

结果

讨论

参考文献

综述

参考文献

缩略词表

个人简历

致谢

附件（已发表论著）

1：三种精子质膜完整性检测方法的比较

2：碳酸酐酶抑制剂对大鼠精子发生和精子成熟的影响