旱莲草单体对人孕烷X受体调控CYP3A4转录表达的调节作用

摘要

目的:研究旱莲草五种中药单体木犀草素、芹菜素、槲皮素、刺囊酸和蟛蜞菊内酯是否可以通过PXR的激活而诱导CYP3A4转录表达.rn 方法:采用MTT法检测五种中药单体对人结肠癌细胞系LS174T细胞的毒性,采用脂质体瞬时转染的方法,在LS 174T细胞中同时转入人PXR表达质粒、CYP3A4报告质粒以及内参质粒,建立双荧光报告基因体系,与不同浓度及不同给药时间的中药单体共同孵育,检测细胞中荧光素酶.rn 结果:五种中药单体对LS174T的IC50值分别为木犀草素(71.08±5.35)μmol·L-1、芹菜素(185.54±9.57)μmol·L-1、槲皮素(112.68±8.34)μmol·L-1、 蟛蜞菊内酯(36.01±9.37)μmol·L-1、 刺囊酸(26.04±5.62)μmol·L-1.刺囊酸(5μmol·L-1、10μmol·L-1和20μmol·L-1)分别诱导PXR调控的CYP3A4表达(1.52±0.31)倍、(1.95±0.31)倍和(2.57±0.23)倍,蟛蜞菊内酯(5μmol·L-1、10μmol·L-1和20μmol·L-1)分别诱导PXR调控的CYP3A4表达(1.57±0.30)倍、(1.91±0.25)倍和(2.14±0.51)倍,木犀草素、槲皮素、芹菜素在试验的浓度范围内不能明显诱导LS174T细胞中PXR调控的CYP3A4表达.在不同给药时间试验中,10μmol·L-1和20μmol·L-1的刺囊酸在12h～48h能诱导PXR调控的CYP3A4表达,诱导能力随时间的延长而呈增强的趋势,各浓度的最大诱导倍数均在48h出现;10μmol·L-1和20μmol·L-1的蟛蜞菊内酯只能在12 h～24h诱导PXR调控的CYP3A4表达,在48h时两个浓度组均出现诱导表达倍数的下调.rn 结论:刺囊酸和蟛蜞菊内酯在LS174T细胞系中可以通过激活PXR诱导CYP3A4转录表达,而木犀草素、芹菜素、槲皮素无此作用.