基于金纳米-亲和素-信使DNA复合物信号放大的发卡式DNA阻抗传感器的制备

摘要

本文中,构建了一种高灵敏度、高选择性的基于金纳米-亲和素-信使DNA复合物放大信号的发卡式DNA生物传感器,此传感器结合了发卡式DNA的构型转变、生物素-亲和素特异性作用以及金纳米负载信使DNA的信号放大功能,采用电化学阻抗技术对靶序列进行检测.利用金硫键作用将5’端修饰巯基,3’端修饰生物素的发卡式探针DNA固定在金电极表面,将连有探针DNA的金电极浸泡在亲和素-金纳米-信使DNA复合物中,由于发卡式DNA的环状区产生的空间位阻阻碍了亲和素与生物素的反应,阻抗信号变化不明显.当探针DNA与互补序列杂交以后,发卡状的探针DNA转变为刚性的直链状,这样就有利于亲和素与生物素的反应,复合物被连接在了电极表面,复合物上所负载的信使DNA明显地放大了阻抗信号.紫外光谱被用来表征复合物的形成.还探究了DNA杂交时间、复合物浸泡时间对检测信号的影响.在最优实验条件下,该传感器可以检测1.0×10-7～1.0×10-15M范围内的互补DNA,检出限达到3.5×10-16M.此外,该DNA生物传感器有较好的选择性,良好的重现性和稳定性.