双歧杆菌BBMN68耐酸菌驯化株的耐酸功能基因研究

摘要

目的:双歧杆菌耐酸能力差,限制其在产品中的应用和体内益生功能的发挥.本研究利用比较基因组学手段分析双歧杆菌BBMN68耐酸驯化株与野生株在基因组水平差异,为双歧杆菌耐酸机制研究提供依据. 方法:利用适应性进化方法,将BBMN68菌株在pH2.5条件下连续50次驯化并筛选耐酸突变株,利用Solexa技术进行全基因组重测序,利用Blast、ClustalW等软件进行突变基因筛选及分析. 结果:利用适应性进化筛选获得菌株BBMN68m,在pH2.5条件下处理2h,其存活率比野生株提高了10000倍,耐酸能力稳定遗传1000代以上.全基因组重测序筛选出16个SNP位点,其中6个突变位点改变氨基酸序列.其中基因BBMN68_1012发生两个核苷酸发生变化,引起编码蛋白胞外多糖合成的关键酶-引导糖基转移酶氨基酸序列变化,蛋白分子量、pI、3D结构发生改变.该基因突变引发的菌株胞外多糖含量、分子结构与改变可能与菌株耐酸能力提高密切相关. 结论:BBMN68_1012基因可能是长双歧杆菌BBMN68m耐酸能力提高的关键基因.