激光扫描共聚焦显微镜的应用研究

摘要

目的：利用激光扫描共聚焦显微镜系统(Laser scanning confocal microscope,LSCM)采集图像,加深理解激光扫描共聚焦显微镜的工作原理以及应用研究.方法：培养贴壁细胞,分别将不同免疫荧光染料(FITC、Alexar Fluor 546nm、DAPI)标记于细胞,在激光共聚焦显微镜下观察细胞的形态及分布特点.结果：激光扫描共聚焦显微镜系统采集得到DAPI标记细胞核、FITC标记细胞浆蛋白以及Alexar Fluor 546nm标记细胞膜蛋白图像,以及三种荧光染料同时标记细胞的叠加图像.结论：不同免疫荧光染料分别标记细胞特异性好,激光扫描共聚焦显微镜采集图像清晰,并深入地理解了激光扫描共聚焦显微镜系统的工作原理和应用方法.激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)是在荧光显微镜成像基础上加装激光扫描装置,应用荧光染料标记细胞,利用计算机系统进行图像分析处理,从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像,成为研究分子细胞生物学、药理学、植物学等领域新一代强有力的研究工具.本文采用多重免疫荧光标记方法将两种荧光染料分别标记于细胞,通过激光扫描共聚焦显微镜系统得到扫描图像.