鳖甲煎丸对肝星状细胞中NF-κ B信号通路相关信号分子及下游靶基因表达的影响

摘要

目的：通过研究鳖甲煎丸药物血清对大鼠肝星状细胞(HSC-T6)中核转录因子-κB(NF-κB)信号通路信号分子NF-κB、IκB及下游靶基因表达的影响,探讨鳖甲煎丸抗肝纤维化的作用机制. 方法：使用鳖甲煎丸药物血清培养永生化HSC-T6细胞,培养24h后采用qPCR检测HSC-T6细胞中p65、p50、VEGF、TIMP-1mRNA的表达水平,免疫荧光法检测HSC-T6细胞中p65的表达水平,Western blotting检测信号分子IκBα、IκBβ及下游靶基因α-SMA的表达水平. 结果：与空白对照组(BC组)及阴性对照组(NC组)相比,中剂量组(M组)、高剂量组(H组)及秋水仙碱对照组(P组)p65、VEGF mRNA的表达水平显著降低(P＜0.05),低剂量组(L组)、M、H及P组TIMP-1mRNA的表达水平显著降低(P＜0.05),但对p50mRNA的表达无显著影响.免疫荧光显示与NC组相比,M、H及P组p65在细胞质中的表达降低.同时,鳖甲煎丸能上调IκBα的蛋白表达水平(P＜0.05),但对IκBβ的表达无显著影响,并能够显著抑制下游靶基因α-SMA的表达(P＜0.05),且具有浓度依赖性. 结论：鳖甲煎丸能够抑制HSC-T6的活化、增殖,这种作用与鳖甲煎丸能够下调HSC-T6细胞中p65的表达水平,上调IκBα的表达水平,进而影响NF-κB信号通路的活化,并有效抑制下游靶基因α-SMA、VEGF、TIMP-1的表达水平密切相关.因此,鳖甲煎丸可能通过调控NF-κB信号通路的活化达到抗肝纤维化的目的.