内源性硫化氢在慢阻肺患者肺组织中表达受损

摘要

为探讨内源性气体信号分子硫化氢在慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)患者肺组织中的表达变化,收集24例肺癌手术正常肺组织标本,包括非吸烟者11例,肺功能正常吸烟者7例,慢阻肺6例.组织切片经HE染色后光镜下观察肺组织病理形态特征,检测肺组织中还原型谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)水平,以反映氧化应激状态.分别采用Western Blotting、Real-time PCR和免疫组化法检测内源性硫化氢合成酶蛋白水平和mRNA表达的变化.采用敏感硫电极测定肺组织匀浆中硫化氢水平.结果表明,3组患者在年龄、身高和体重的差异无统计学意义,慢阻肺组FEV1/FVC和FEV1占预计值％显著低于吸烟组和非吸烟组.HE染色显示慢阻肺组的肺泡壁变薄,肺泡腔扩大,部分肺泡破裂融合形成肺大疱;单纯吸烟组可见炎症细胞浸润,部分有黑色颗粒物沉积,肺泡破坏不明显.与非吸烟组比较，吸烟组和慢阻肺组患者的肺组织中GSH分别降低51.1%(P<0.01)和41%(P<0.05)，T-SOD分别降低29.4%(P<0.01)和39.3%(P<0.01)，表明氧化应激增加。免疫组化结果显示，硫化氢合成酶肤硫醚-γ-裂解酶(CGL)主要表达于气道平滑肌细胞、血管平滑肌细胞及肺泡上皮细胞的细胞质。非吸烟组CGL呈阳性表达，为棕褐色颗粒。吸烟组和慢阻肺组均呈弱阳性表达，为棕黄色颗粒，且比非吸烟组明显减少。Western Blot结果表明，与非吸烟组相比，吸烟患者和慢阻肺患者肺组织中CGL蛋白的表达分别减少35%和39%。然而慢阻肺组CGL的mRNA水平与CGL蛋白水平趋势相反，慢阻肺组CGL的mRNA水平比非吸烟组增加7.6倍(P<0.01)。3组患者肺组织匀浆中硫化氢含量的差异无统计学意义(P>0.27)。