金黄色葡萄球菌外排蛋白QacA的优化表达研究

摘要

目的：提高金黄色葡萄球菌外排基因qacA在大肠杆菌中的表达水平,为深入研究其结构功能、设计有效外排抑制剂奠定基础.方法:以重组质粒pBluescript II SK(+)/qacA为模板,通过PCR方法扩增出带有AatⅡ和NheⅠ酶切位点的qacA基因,经相应酶切、纯化后将目的基因分别与同样进行酶切的质粒pET-coco1在T4连接酶的作用下连接；同时根据大肠杆菌偏爱密码子,由公司对qacA基因进行密码子优化,将合成的基因插入到pET-cocol载体中.结论：优化后的pET-cocol/qacA在大肠杆菌中得到高效表达，为进一步研究qacA生物学功能奠定了物质基础。