解毒祛瘀滋肾方对RAW264.7小鼠单核巨噬细胞TLR9信号通路的影响

摘要

目的:通过研究解毒祛瘀滋肾方对寡脱氧核苷酸(oligodeoxynucletide,ODN)刺激后RAW264.7小鼠单核巨噬细胞Ton样受体9(toll like receptor9,TLR9)信号通路异常活化的的影响,探讨解毒祛瘀滋肾方在治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)时是通过调控TLP9信号通路来减少糖皮质激素(ghcocorticoids,GC)的用量从而起到增效减毒的作用.方法:体外培养RAW264.7小鼠单核巨噬细胞,随机分为四组,即空白血清组、ODN刺激组、ODN+地塞米松组、ODN+含药血清组.干预24h后收集细胞,RT-PCR检测TLR9、髓样分化因子88 (MyD88)、和核转录因子-κB (NF-κB)、干扰素-α(IFN-α)mRNA的表达;Western blot检测TLR9、NF-κB蛋白的表达.结果:各组RAW264.7细胞TLR9、MyD88、NF-κB、IFN-α、IFN-βmRNA的表达:与空白血清组比较,ODN刺激组的TLR9、MyD88、NF-κB、IFN-β的值均有所升高,其差异具有统计学意义(P＜0.05);与ODN刺激组比较,ODN+地塞米松组TLR9的值有一定程度的下降,但差异无统计学意义(P＞0.05),MyD88、NFκ-B、IFN-α的值均有所下降,其差异具有统计学意义(P＜0.05),IFN-β的值明显低于ODN刺激组,差异具有统计学意义(P＜0.01);与ODN刺激组比较,ODN+含药血清组TLR9、MyD88、NF-κB、IFN-α的值均有所下降,其差异具有统计学意义(P＜0.05).各组RAW264.7细胞TLR9、NF-κB蛋白的表达:与空白血清组比较,ODN刺激组的TLR9、NF-κB的值均有所升高,其差异具有统计学意义(P＜0.01);与ODN刺激组比较,ODN+地塞米松组TLR9的值有一定程度的下降,但差异无统计学意义(P＞0.05),NF-κB的值有所下降,其差异具有统计学意义(P＜0.01);与ODN刺激组比较,ODN+含药血清组TLR9、NFκ-B的值均有所下降,其差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:第一,解毒祛瘀滋肾方可以抑制ODN刺激后RAW264.7单核巨噬细胞异常活化的TLB9信号通路中TLR9、MyD88、NF-κB、IFN-α、IFN-βmRNA和TLR9、MyD88蛋白的表达.第二,解毒祛瘀滋肾方在治疗SLE时可能是通过调控TLR9信号通路来少GC的用量并起到增效减毒的作用.