RARs在单侧输尿管梗阻大鼠肾脏组织中的表达和意义

摘要

目的:探讨维甲酸受体(RARs)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织中的表达与意义.方法:6周龄雄性Wistar大鼠80只随机分为模型组和假手术组,每组40只,所有大鼠行麻醉后左背侧切口术,其中模型组大鼠的手术为分离左输尿管后行双重结扎,而假手术组大鼠的手术只探查到肾包膜.于造模后的第2周末与4周末分别处死20只大鼠,切片行Masson和HE染色检测肾脏病理学变化,计算肾间质纤维化(RIF)指数;应用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)、免疫组织化学和免疫蛋白印迹技术(Westem blot)检测大鼠肾脏组织维甲酸受体α(RARα)、维甲酸受体β(RARβ)、维甲酸受体γ(RARγ)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA和蛋白表达;应用免疫组织化学、western-blot法检测肾脏组织纤维连接蛋白(FN)与Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的蛋白表达.结果:(1)与假手术组比较，模型组大鼠:①肾脏病理明显改变:大量的淋巴细胞、单核细胞浸润，萎缩的肾小管上皮细胞及肾小管基底膜破坏，形成胶原纤维化，RIF指数显著增高，第4周末较第2周末肾脏RIF指数显著增高;②肾脏组织RARa, RARp的mRNA及其蛋白表达均显著降低，第4周末较第2周末表达降低更为显著;两组大鼠肾脏组织RARy的mRNA及其蛋白表达均无显著差异;③肾脏组织TGF-β1的mRNA及其蛋白表达均显著增加，第4周末较第2周末表达增高更为显著;④肾脏组织Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均显著增高，第4周末较第2周末表达增高更为显著。(2)相关性分析:大鼠肾脏组织RARa的蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ、FN蛋白表达均呈显著负相关;肾脏组织RARp的蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ、FN蛋白表达均呈显著负相关;肾脏组织TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达与RIF指数均呈显著正相关;而肾脏组织RARg的蛋白表达与RIF指数、TGF-β1、Col-Ⅳ和FN的蛋白表达无显著相关。结论:UUO所致RIF大鼠肾脏组织RARa,RARp的mRNA及其蛋白表达均显著降低，梗阻时间越长表达越低，RIF的程度越严重。RARa/RARp可能参与了RIF的发生发展。