P-gp170与HSP90在儿童原发性肾病综合征中的表达及其临床意义

摘要

目的:检测P-糖蛋白170(P-gp170)及热休克蛋白90(HSP90)在原发性肾病综合征(PNS)患儿不同时间点外周血淋巴细胞及肾组织中的表达情况,探讨P-gp170与HSP90介导糖皮质激素(GC)耐药的可能机制及其临床意义.方法:选择在苏州大学附属儿童医院住院的PNS患儿20例,按照GC对患儿的疗效分成两组:激素耐药型肾病综合征(SRNS)和激素敏感型肾病综合征(SSNS),各10名,10名健康儿童作为正常对照组,分两个时间点采集外周血标本:(1)发病初未用GC时;(2)足量GC治疗4周后.进行如下实验:①流式细胞术(FCM)检测PNS患儿及正常对照组在不同时间点外周血淋巴细胞中P-gp170及HSP90的表达.②10例SRNS患儿均在激素治疗4周后行肾穿刺活检术,5例正常肾组织为对照,用免疫组织化学方法检测肾组织中P-gp170及HSP90的表达.结果:(1)SSNS组、SRNS组和正常对照组外周血淋巴细胞中均有P-gp170及HSP90的表达;(2)激素治疗前SSNS组、SRNS组外周血淋巴细胞中的P-gp170及HSP90高于正常对照组;激素治疗4周后SSNS组及SRNS组外周血淋巴细胞中的P-gp170明显高于治疗前,HSP90较前下降;(3)激素治疗前SRNS组外周血淋巴细胞中P-gp170明显高于SSNS组及正常对照组，治疗后SRNS组外周血淋巴细胞中P-gp170较治疗前升高;激素治疗前SRNS组外周血淋巴细胞中HSP90明显高于SSNS组及正常对照组，治疗后SRNS组外周血淋巴细胞中HSP90较治疗前下降，但仍高于正常对照组护;(4)SRNS组与正常对照组患儿肾组织中P-gp170主要表达于肾小管及肾间质，SRNS组肾组织近曲小管P-gp170阳性率表达明显高于正常组,SRNS组内近曲小管P-gp170阳性率表达明显高于远曲小管.(5)正常对照组与SRNS组患儿肾组织中均有HSP90的表达，多在肾小球及肾小管的胞浆和胞核内表达，SRNS组患儿肾组织中HSP90表达明显高于正常对照组.(6)PNS患儿外周血淋巴细胞中P-gp170及日SP90的表达分别与24小时尿蛋白定量正相关, SRNS组患儿外周血淋巴细胞中P-gp170表达与SRNS组患儿肾脏近曲小管中P-gp170的灰度值及病理积分呈等级正相关,SRNS组患儿外周血淋巴细胞中HSP90表达与SRNS组患儿肾脏远曲小管中HSP90的灰度值及病理积分呈等级正相关,SRNS组肾脏病理积分与其24小时尿蛋白定量高度等级正相关.结论:(1)应用激素可能诱导PNS患儿外周血淋巴细胞P-gp170过度表达;(2)SRNS患儿肾组织中P-gp170的表达强度与病理积分明显正相关，外周血淋巴细胞及肾组织中P-gp170高表达可能参与了SRNS患儿激素耐药的发生和发展;(3)SRNS患儿外周血淋巴细胞及肾组织中HSP90高表达可能与激素耐药有关;(4)SRNS患儿外周血P-gp170及HSP90的表达一定程度上可反映肾脏病变的程度。