血管重构在SD哮喘大鼠发病机制中作用初探

摘要

目的:探索慢性支气管哮喘中是否存在血管重构,其与气道炎症和气道重构间是否存在相关性.方法:1.实验设计及分组:(1)OVA致敏/激发SD大鼠支气管哮喘组,按激发时点不同分为4周、8周、12周组,分别为A4w,A8w,A12w组. (2)相应时点对照组(用生理盐水致敏及雾化),分别为C4w,C8w,C12w组.每组各8只动物.2.建立OVA致敏SD大鼠支气管哮喘模型及对照组模型,收集标本.包括:支气管肺泡灌洗液(BALF)、血清、肺组织(石蜡包埋及液氮保存用作蛋白及mRNA检测)3.检测气道炎症及气道重塑(1)BALF、血清中炎症因子测定:ELISA法检测IL-4、INF-γ水平(2)肺组织石蜡切片HE染色:a.半定量评定支气管周围炎症细胞浸润程度,根据文献方法进行评分0-4分.(4)肺组织Masson染色测定胶原沉积，根据文献测定气道基底膜胶原面积(WAc)，结果以单位长度基底膜的胶原面积(WAc/Pbm,um2/um)表示。上述结果每组测定≥3气道。4.检测不同时点血管重构指标(1)免疫组织化学检测SM22a(2)免疫组织化学检测p-AKT.5.统计学分析结果:1.不同时点哮喘组与对照组相比气道炎症及气道重塑的指标均升高，差异有统计学意义。2.不同时点哮喘组SM22a表达减少、而p-AKT表达增高，提示肺血管平滑肌细胞存在收缩型向合成型的转变，即增殖状态;提示血管重构的发生，并与气道炎症及气道重塑呈相关关系。结论:OVA致敏SD大鼠支气管哮喘模型中存在血管重构，与气道炎症和气道重塑间存在相关关系，提示血管重构可能参与了哮喘的发生。