NOD/SCID小鼠中枢神经系统白血病模型的建立

摘要

目的：通过侧脑室注射方法在NOD/SCID小鼠体内建立了中枢神经系统白血病模型,为进一步研究白血病细胞向中枢神经系统的髓外浸润机制奠定基础.方法：腹腔注射5％水合氯醛麻醉NOD/SCID小鼠,小鼠侧脑室注射SHI-1细胞2x104个细胞.实验组小鼠侧脑室注射后d3处死两只,后每周各处死两只,直至出现小鼠死亡,如果小鼠出现濒死状态及时处理;生存期组小鼠侧脑室注射后观察生存期.免疫组化检测NOD/SICD小鼠脑组织切片人白细胞共同抗原(LCA)表达情况.巢式PCR检测小鼠各脏器及骨髓细胞的融合基因MLL/AF6的表达.结果：NOD/SCID小鼠侧脑室接种SHI-1细胞后,d2均活动如常,随着时间的延长,小鼠出现毛发稀疏,活动减少,脊背拱起,进食减少,体重下降,并逐渐衰竭死亡.生存期组的8只小鼠生存期为15d～48d,中位数为15d.实验组发现于第一、二、四周各脏器均未扩增出融合基因,只有在第三周一例小鼠的肺、骨髓、颈部淋巴结扩增出融合基因,产物为280bp.脑组织病理切片示:细胞浸润明显,颅骨、椎体骨髓腔中有大量白血病细胞浸润,可突破骨质向外浸润,也可见有明显的脊髓实质的浸润.颅内浸润多发生于硬膜下腔及软膜蛛网膜,并沿软脑膜表面血管的Virchow-Robin区分布,白血病细胞广泛附着于大脑,小脑,脑间裂隙表面,Ⅲ级者可见大量白血病由脑皮层表面向深部的脑实质浸润.结论：侧脑室注射急性单核细胞白血病细胞株SHI-1细胞,可成功建立NOD/SCID小鼠中枢神经系统白血病模型,可较好的模型人类中枢神经系统白血病病变情况.