三氧化二砷对肾母细胞瘤细胞的抗肿瘤作用及其机制探讨

摘要

目的：观察三氧化二砷(AS203)对体外人肾母细胞瘤细胞SK-NEP-1细胞株增殖和凋亡的影响,探讨凋亡相关蛋白Bcl-2和Caspase3的变化及其在凋亡过程中的作用机制.方法：采用体外细胞培养技术,以不同浓度AS203作用于人肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞,实验分为A、B、C、D和E5组,其细胞培养液中三氧化二砷的药物终浓度分别为0,1.25,2.5,5,10μmol/l,培养24h后收集细胞.通过四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度A8203对SK-NEP-1细胞的增殖抑制率;应用Annexin-V和PI双染细胞流式法检测细胞凋亡率;ELISA法检测SK-NEP-1细胞Bcl-2蛋白的表达;Caspase3试剂盒检测细胞Caspase3活性变化情况.结果：1.MTT检测显示各实验组可明显抑制SK-NEP-1细胞增殖,其增殖抑制率较对照组明显增加(P＜0.05),随着A8203浓度增加,其增殖抑制率逐渐升高.2.流式细胞仪检测各实验组细胞凋亡率较对照组明显增加(P＜0.05),细胞凋亡率与AS203呈浓度依赖性.3.ELISA结果显示实验组Bcl-2蛋白表达较对照组明显减少(P＜0.05).4.A8203作用SK-NEP-1细胞后Caspase3活性表达上调.以上检测各浓度组与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论三氧化二砷能明显抑制SK-NEP-1细胞的增殖,并进一步诱导其凋亡;可以下调SK-NEP-1细胞中Bcl-2蛋白表达,并激活Caspase3活性.spal(^)＞0.01).结论：As203能有效抑制RD细胞增殖和诱导其调亡,其抗肿瘤机制可能与下调凋亡相关蛋白Bcl-2表达及上调Caspase3的表达有关.