羽衣甘蓝自交不亲和系的选育及S13b单倍型的鉴定

摘要

本文采用亲和指数法(种子数/自交授粉花朵数)分别在羽衣甘蓝“赤兔”和“白波”栽培品种的自交后代中,经过三年的自交选育得到一个自交不亲和系4.1.1和一个自交亲和系3.2.3。我们针对于芸苔属植物中F1代杂交种的生产及其对自交不亲和分子机制的研究都需要对羽衣甘蓝自交不亲和系S单倍型鉴定的问题,我们采用PCR方法利用引物PK1和PK4获得了BoSRK,的基因组序列,此序列的大小为919bp,经过数据库检索比对后发现BoSRKx的序列与BoSRK13b的序列完全一致;另外,通过反转录PCR的方法获得了BoSRKx的cDNA序列,结果发现BoSRKx和BoSRK13b的序列在转录水平上也是完全一致的。另一方面,我们采用SCR守信号肽编码区和NotI-oligo(dT)设计的引物获得了BoSCRx的cDNA序列,经过数据库的检索比对后发现BoSCRx的序列比BoSCR13的序列只多出3个连续的碱基。由于在数据库中不存在BoSCR13b的序列,所以我们根据以上的结果认为Sr就是S13b最后,通过遗传分析结合PCR-RFLP方法和DNA-blot方法对自交不亲和系S13b进行了纯合体的鉴定。