量子点流式微球技术定量检测血清胃癌抗原MG-Ag方法学建立及评价

摘要

目的：建立量子点流式微球技术检测血清胃癌相关抗原MG7-Ag法对该方法进行评价并初步应用于临床检测.rn 方法：免抗MG7-Ag多克隆抗体与5μm微球偶联,与血清MG7-Ag结合,加入鼠抗MG7-Ag单克隆抗体,最后加入生物素化的羊抗鼠IgG和链霉亲和素化的量子点,使微球表面携带量子点荧光,通过流式细胞仪检测平均荧光强度(mean fluorescent intensity,MFI).rn 结果：微球均一性好,2h为最佳偶联时间,检测灵敏度达0.23ng/ml、线性范围为0.23-100ng/ml,变异系数可接受(正常组：10.43％、胃癌组：7.87％).低浓度胆固醇(6.5mmol/L)、胆红素(0.15mmol/L)和三酰甘油(18mmol/L)对检测干扰小.阳性下限值定为15ng/ml.胃癌组血清MG7-Ag浓度显著高于对照组、浅表性胃炎组、胃溃疡组、萎缩性胃炎/增生组(P＜0.01);萎缩性胃炎/增生组MG7-Ag浓度显著高于对照组、浅表性胃炎组、胃溃疡组(P＜0.01);胃溃疡组高于对照组(P＜0.05);缩性胃炎/增生组阳性率为19.04％,胃癌组阳性率为78.94％,两组比较具有显著性差异(P＜0.01)。rn 结论：本实验建立的量子点流式微球技术可用于血清胃癌抗原MG7-Ag的定量测定,其检测性能良好,其检测结果与临床疾病发生发展相符合.