脓毒症发病机制和分子靶向治疗的新视野:SphK1/S1P/S1PR途径

摘要

脓毒症(sepsis),又称全身性感染,是创伤、烧伤、感染及外科大手术围术期常见的严重并发症之一.如何早期诊断、及时救治、有效控制脓毒症的发生发展是危重病医学亟待解决的重大课题.鉴于SphKl/SIP/SIPR途径的生物学活性的研究进展，猜测这个途径相关关键分子可能会成为今后脓毒症发病机制和分子靶向治疗的新突破。因此本研究组首先，在药理及基因水平干预单核巨噬细胞SphKl，从而抑制SIP产生，LPS刺激干预后细胞，采用Western-blot、ELISA、realtlme-PCR等方法检测细胞内或细胞外促炎介质IL-1β、TNF-α、IL-6等的表达和浓度；并进一步检测活化NF-κB等转录因子、及Nalρ3炎性体通路关键分子等。紧接着，药理及基因水平干预单核巨噬细胞SIPR，从而干预SIP作用的受体，IPS刺激干预后细胞，采用Western-blot、ELISA、realtlme-PCR等方法检测细胞内或细胞外促炎介质IL-1β、TNF-α、IL-6等的表达和浓度。并进一步检测活化NF-κB等转录因子、及Nalρ3炎性体通路关键分子等。最终，采用基因敲除小鼠观察盲肠接扎穿孔后炎症反应水平、器官损伤程度、存活率等指标。研究发现：干预SphKl或直接SIP作用，能够影响单核巨噬细胞炎症反应，并且与激活Nalp3炎性体通路等机制相关；干预SIPR龍够影响单核巨噬细胞炎症反应，且与活化NF-KB等转录因子相关；整体SIPR敲除小鼠，盲肠结扎穿孔脓毒症模型后，外周血IL-1β、TNF-α、IL-6等促炎介质水平明显下降，肺、肝等脏器损伤减轻，总体7天存活率明显改善。这提示SphKl/SIP/SIPR通路参与脓毒症单核细胞免疫炎症反应，具体机制与活化NF-κB等转录因子、激活Nalρ3炎性体通路等机制相关。但是，细胞水平、实验动物的结果仅仅为临床研究提供参考，脓毒症预后的改善还是任重道远。