朊毒体免疫学检测方法建立及其在中国疯牛病、羊痒病监测中的应用

摘要

研究目的:应用单抗对PrP的分子特性进行研究,建立疯牛病、羊痒病免疫学检测方法;方法:原核表达牛、羊PrP,制备特异性单抗,Western blotting、IHC、分段表达方法鉴定单抗的免疫反应性和抗原表位;结果:获得免疫学反应特性多样化的系列单抗,分别针对5个抗原表位,单抗2H3、4H10可特异识别羊PrP,根据2H3所针对的抗原表位,推断出第208位氨基酸是牛、羊PrP特异性抗原表位的关键位点,建立了单抗介导的疯牛病、羊痒病Western blotting、IHC检测方法,2001-2006年对全国26个省、自治区、直辖市的13 945份牛脑样品、4 552份羊脑样品进行了检测;结论:获得的一系列单抗为PrP分子机制的研究提供了工具;国内临床样品的检测尚未发现阳性病例,为国际认证提供了可靠依据.