地高辛标记探针检测猪胸膜肺炎放线杆菌的研究与应用

摘要

利用PCR反应扩增出胸膜肺炎放线杆菌APXIV基因650bp的DNA,回收并纯化PCR产物,用地高辛标记,制备出地高辛标记的核酸探针.该探针与不同血清型的胸膜肺炎放线杆菌均能发生特异性杂交,而与大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌、猪肺炎支原体、支气管败血波氏杆菌等细菌的核酸杂交均为阴性.对胸膜肺炎放线杆菌的最低检出限量为10×102个放线杆菌.对疑似胸膜肺炎放线杆菌感染病变组织检测结果表明,在扁桃体、鼻腔、气管、肺脏均可检测出胸膜肺炎放线杆菌,以扁桃体的检出率最高.该研究为猪胸膜肺炎放线杆菌的诊断和流行病学调查提供了良好的方法。