96孔板比浊法胰脂肪酶抑制剂体外筛选模型的建立

摘要

目的:建立灵敏可靠、简单易行、实用性强的胰脂肪酶抑制剂体外筛选模型.方法:采用96孔板比浊法,选择临床注射用静脉脂肪乳剂Intralipid作酶活性测定底物,测定:(1)静脉脂肪乳剂的稳定性;(2)胰脂肪酶对静脉脂肪乳剂的水解;(3)奥利司他对胰脂肪酶活性的抑制;(4)BSA对奥利司他抑制胰脂肪酶活性的影响.结果:(1)该静脉脂肪乳剂稀释500-1000倍后性质依然稳定,可用作胰脂肪酶活性测定底物.(2)胰脂肪酶可水解此乳剂底物,引起浊度下降,其速度随加入酶量的增加而加快.(3)阳性对照药奥利司他(orlistat)可抑制胰脂肪酶对此静脉脂肪乳剂底物的水解,并呈现良好量效关系.(4)蛋白成分(BSA)对奥利司他抑制胰脂肪酶活性的作用影响不大.结论:采用Intralipid作乳剂底物所建立的96孔比浊法胰脂肪酶测定方法灵敏可靠、简便易行,是体外筛选胰脂肪酶抑制剂的良好模型.