健脾解毒方介导COX-2激活JNK信号通路调控人肠癌HCT8/V细胞多药耐药的研究

摘要

目的:探讨健脾解毒方(JPJD)对人结肠癌多药耐药细胞HCT8/V中环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)激活JNK(c-JunNH2-terminal kinase)信号转导通路调节作用及对多药耐药的逆转作用.方法:Western Blot检测COX-2抑制剂以及COX-2过表达质粒对人结肠癌HCT8/V耐药细胞JNK信号通路中c-Jun、p-c-Jun (63/73)的表达变化以及P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的调节作用,MTT法检测健脾解毒方药物血清联合多种化疗药物对细胞增殖情况的影响.结果:Western blot结果显示,COX-2选择性抑制剂NS-398(20 u M)作用HCT8/V细胞后,可以阻止JNK信号通路中c-Jun的磷酸化(P＜0.01);同时耐药细胞转染COX-2过表达质粒后,c-Jun的磷酸化增加,与空白质粒组相比具有统计学意义(P＜0.01).健脾解毒方药物血清干预48小时后的耐药细胞组内COX-2,p-c-Jun(63/73)表达下降,与空白血清组相比P＜0.01.同时健脾解毒方联合化疗药物后能降低耐药细胞的耐药倍数(P＜0.01),增加对VCR、DDP、5-Fu、THP四种化疗药物的敏感性.结论:健脾解毒方可以逆转HCT8/V细胞的多药耐药性,其机理可能与抑制COX-2激活JNK信号通路,调控P-gp变化有关.